Vortexovanie neodstrihne vašu RNA, aby bola nepoužiteľná, ak robíte náhodné priming RT – iba ak chcete klonovať dlhú mRNA. Technická podpora Invitrogen je tiež správna. Chloroform je ťažší ako Trizol a klesne na dno skúmavky.
Je bezpečné vortexovať RNA?
Vortexujte lyzáty Trizol alebo vzorky RNA, aby ste predišli strihu. Po extrakcii uchovávajte vzorky RNA stále na ľade. Tento protokol je určený pre vzorky lyzované 1 ml Trizolu v 1,5 alebo 2 ml skúmavke.
Viete zahriať RNA?
Preto sa vyhýbajte vysokým teplotám ( nad +65°C), pretože ovplyvňujú integritu RNA. Namiesto toho na roztavenie sekundárnych štruktúr zahrejte RNA na +65 °C počas 15 minút v prítomnosti denaturačných pufrov.
Ako resuspendujete pelety RNA?
rozsuspendujte peletu teplou vodou (40-50 °C). inkubujte pri teplote 45 °C počas 10 minút. vložte ich do +4 na 4-6 hodín.
Ako zrážate RNA?
A.
Po úprave koncentrácie soli sa môže RNA vyzrážať pridaním 2,5 objemu etanolu alebo 1 objemu izopropanolu a dôkladným premiešaním, nasleduje ochladenie aspoň 15 minút na -20° C.
