Pojem reverzná fáza popisuje chromatografický režim, ktorý je presne opakom normálnej fázy, konkrétne použitie polárnej mobilnej fázy a nepolárnej [hydrofóbnej] stacionárnej fáza. … C18-viazaný oxid kremičitý [niekedy nazývaný ODS] je najpopulárnejším typom HPLC s reverznou fázou.
Čo sa deje pri HPLC s reverznou fázou?
Chromatografia na reverznej fáze využíva polárnu (vodnú) mobilnú fázu. Výsledkom je, že hydrofóbne molekuly v polárnej mobilnej fáze majú tendenciu adsorbovať sa do hydrofóbnej stacionárnej fázy a hydrofilné molekuly v mobilnej fáze prejdú kolónou a eluujú sa ako prvé.
Aké sú stacionárne a mobilné fázy pri HPLC na reverznej fáze?
Pri chromatografii na reverznej fáze, ktorá je bežnejšou formou HPLC, stacionárna fáza je nepolárna a mobilná fáza je polárna.
Prečo je preferovaná HPLC s reverznou fázou?
Reverzná fázová chromatografia poskytuje lepšiu rozpustnosť pre polárne analyty, používa netoxické rozpúšťadlá, ponúka metódu na odstránenie kontaminantov a aditív mobilnej fázy a umožňuje včasné získanie vzorky s malým množstvom rozpúšťadla odparovanie.
Aký je rozdiel medzi normálnou a reverznou fázovou HPLC?
Kľúčový rozdiel medzi HPLC na reverznej fáze a HPLC s normálnou fázou je v tom, že HPLC s reverznou fázou používa nepolárnu stacionárnu fázu a polárnu mobilnú fázu, zatiaľ čo HPLC s normálnou fázou používa polárnu stacionárnu fázu fázy a menej polárnej mobilnej fázy.