Logo sk.boatexistence.com

Ako urobiť imunofluorescenciu?

Obsah:

Ako urobiť imunofluorescenciu?
Ako urobiť imunofluorescenciu?

Video: Ako urobiť imunofluorescenciu?

Video: Ako urobiť imunofluorescenciu?
Video: Akon - Smack That (Official Music Video) ft. Eminem 2024, Smieť
Anonim

Nasleduje prehľad rôznych krokov protokolu nepriameho imunofluorescenčného farbenia

  1. Plánovanie experimentov a príprava vzoriek. …
  2. Upevnenie vzorky. …
  3. Permeabilizácia buniek. …
  4. Blokovanie. …
  5. Inkubácia primárnych protilátok. …
  6. Inkubácia sekundárnej protilátky. …
  7. Zarážka a montáž.

Ako vykonávate imunofluorescenciu?

Všetky inkubačné kroky prebiehajú pri izbovej teplote

  1. Dvakrát umyte bunky a pomocou pinzety opatrne vložte krycie sklíčko s bunkami otočenými hore do zvlhčovanej komory.
  2. Zafixujte 4 % formaldehydom na 10 minút a umyte 3×.
  3. Permeabilizujte 0,1 % TX-100/PBS na 15–20 minút a umyte 3×.

Ako používate imunofluorescenciu v bunke?

Imunofluorescenčný protokol pre adherentné bunky

  1. Nasaďte 1–1,5 x 104 buniek na jamku 4-komorového podložného sklíčka v 500 ml kultivačného média. Inkubujte pri 37 °C a 5 % CO2.
  2. 32–36 hodín po vysiatí buniek odstráňte kultivačné médium a bunky 3-krát opláchnite 500 µl 1X PBS.

Aký je príklad imunofluorescencie?

Výskumník môže napríklad vytvoriť primárne protilátky u kozy, ktoré rozpoznávajú niekoľko antigénov, a potom použiť farbivo spojené králičie sekundárne protilátky, ktoré rozpoznávajú konštantnú oblasť kozej protilátky („ králičie anti-kozie protilátky).

Aké je použitie imunofluorescenčného farbenia?

Imunofluorescenčné (IF) farbenie je široko používaná technika v biologickom výskume a klinickej diagnostike IF využíva fluorescenčne značené protilátky na detekciu špecifických cieľových antigénov. Nasleduje zobrazovanie, je to veľmi priama technika, pretože niečo skutočne vidíte.

Odporúča: