Reštrikčné štiepenie sa dosiahne inkubáciou cieľovej molekuly DNA s restrikčnými enzýmami – enzýmami, ktoré rozpoznávajú a viažu špecifické sekvencie DNA a štiepia sa na špecifických nukleotidoch buď v rámci rozpoznávacej sekvencie alebo mimo nej rozpoznávacej sekvencie.
Ako trávia reštrikčné enzýmy?
Restriction Enzyme Digest Protocol
- Pridajte komponenty do čistej trubice v uvedenom poradí: …
- Reakciu inkubujte pri teplote trávenia (zvyčajne 37 °C) počas 1 hodiny.
- Zastavte trávenie tepelnou inaktiváciou (65 °C počas 15 minút) alebo pridaním 10 mM konečnej koncentrácie EDTA.
Strávi reštrikčný enzým DNA?
Reštrikčné enzýmy možno použiť aj na vytvorenie kompatibilných koncov na produktoch PCR. … Vo všetkých prípadoch sa na štiepenie DNA používa jeden alebo viacero reštrikčných enzýmov , výsledkom čoho je nesmerové alebo smerové vloženie do kompatibilného plazmidu.
Ako fungujú reštrikčné enzýmy DNA?
Ako fungujú reštrikčné enzýmy? Ako všetky enzýmy, reštrikčný enzým funguje prispôsobením tvaru k tvaru Keď príde do kontaktu so sekvenciou DNA s tvarom, ktorý sa zhoduje s časťou enzýmu, nazývanou rozpoznávacie miesto, obalí sa okolo DNA a spôsobí prerušenie oboch reťazcov molekuly DNA.
Aký enzým trávi DNA?
Tieto enzýmy sa nazývajú reštrikčné endonukleázy alebo reštrikčné enzýmy a sú schopné štiepiť molekuly DNA v pozíciách, v ktorých sú prítomné konkrétne krátke sekvencie báz.
