Je možné zmraziť a rozmraziť RIPA pufor 2-3 krát bez toho, aby stratil svoju účinnosť, pokiaľ je počas používania uložený na ľade (20-30 minút). Pufer skladujte zmrazený pri teplote -80 stupňov C.
Ako dlho si môžem ponechať vyrovnávaciu pamäť RIPA?
1. Ak sa pufor bude používať nepretržite, odporúča sa, aby sa 10-násobný pufor uchovával pri teplote 4 °C počas 1-2 týždňov. Na dlhšiu dobu by sa mal tlmivý roztok skladovať pri -20 °C. Ak sa má vykonať veľa malých experimentov, odporúča sa použiť alikvóty 10x pufra.
Je možné uložiť vyrovnávaciu pamäť RIPA?
Pripravený RIPA pufor by mal byť rozdelený na alikvóty a skladovaný pri - 20°C. Pred okamžitým použitím pridajte inhibítory proteázy a/alebo fosfatázy do rozmrazenej alikvotnej časti. Jeden mililiter pufra postačuje na lýzu približne 5 miliónov buniek. …
Ako skladujete RIPA lyzáty?
Pripravené lyzáty použite čo najrýchlejšie a skladujte čo najkratší čas. Skladujte lyzáty pri teplote -80 °C tak dlho, ako je to možné. V prípade lyzátov, ktoré bude potrebné dlhodobo uchovávať, preneste čerstvo pripravené skúmavky do dostupnej mrazničky s teplotou -80 °C, aby ste zabránili degradácii.
Ako rozmrazujete RIPA buffer?
Po odstránení konečného premývacieho roztoku z buniek pridajte do bunkovej pelety vhodný objem pufra RIPA (1 ml na 0,5 až 5 × 107 buniek) a krátko premiešajte alebo vortexujte, aby sa bunky úplne resuspendovali. Inkubujte na ľade alebo v chladničke (2–8 °C) päť minút.
