Sféroidy boli vytvorené pomocou dobre známej metódy visiacich kvapiek Zozbierané bunky boli suspendované v rastovom médiu v koncentrácii 5 000 buniek/20 μl. Kvapky pripraveného bunkového roztoku (20 μl/kvapka) sa potom naniesli na viečko 60 mm doštičky pre tkanivové kultúry a inkubovali sa 2 dni, aby sa vytvorili sféroidy.
Ako sa vytvárajú sféroidy?
Sferoidy možno pestovať niekoľkými rôznymi metódami. Jednou z bežných metód je použitie doštičiek s nízkou bunkovou adhéziou, typicky 96-jamkovej, na hromadnú produkciu sféroidných kultúr, kde sa agregáty tvoria v zaoblenom dne bunkových doštičiek.
Čo sú to bunkové sféroidy?
Sféroidy, trojrozmerné (3D) bunkové kultúry, ktoré sa počas proliferácie usporiadajú do guľovitých útvarov, dostali svoje meno v 70. rokoch, keď vedci pozorovali pľúca škrečka bunky pestované v suspenzii sa usporiadali do takmer dokonalej guľovej formy.
Ako meriate sféroidy?
Analogicky sa objem sféroidov môže použiť ako miera účinnosti pre štúdie liekov proti rakovine in vitro. Objem sféroidu ( V=0,5DĺžkaŠírka2 ) sa určuje na základe hlavnej a vedľajšej axiálnej dĺžky (bežnejšie známej ako dĺžka a šírka) zo sféroidov6, 7
Koľko buniek je v sféroide?
Obr. 10. Počítačová simulácia prežitia sféroidov pôvodne zložených z 5 × 104 buniek a ožiarených podľa rôznych frakcionačných schém.