Logo sk.boatexistence.com

Dokážete eluovať proteín?

Obsah:

Dokážete eluovať proteín?
Dokážete eluovať proteín?

Video: Dokážete eluovať proteín?

Video: Dokážete eluovať proteín?
Video: Dokážete se bavit i bez alkoholu? Reakce na video od @Jirkavysvetlujeveci 2024, Júl
Anonim

Ak váš proteín nemá rovnakú veľkosť ako vaša protilátka, môžete eluovať pomocou 0,1 M glycínu, pH 2-3 a potom oddeliť požadovaný proteín od protilátky pomocou SEC (ako superdex 200).

Čo uvoľňuje proteín?

Proteíny sa eluujú gradientom rastúcich množstiev organického rozpúšťadla, ako je acetonitril. Proteíny sa eluujú podľa ich hydrofóbnosti. Po čistení pomocou HPLC je proteín v roztoku, ktorý obsahuje iba prchavé zlúčeniny a možno ho ľahko lyofilizovať.

Prečo majú proteíny elúciu s nízkym pH?

Je známe, že použitie pufra s nízkym pH na elúciu z proteínu A prispieva k agregácii produktu Obmedzený súbor dôkazov však naznačuje, že nízke pH nemusí byť jediným príčinou agregácie pri chromatografii proteínu A, skôr môžu významne prispieť iné aspekty procesu.

Ako prebieha elúcia?

V analytickej a organickej chémii je elúcia proces extrakcia jedného materiálu z druhého premytím rozpúšťadlom; ako pri premývaní naplnených iónomeničových živíc na odstránenie zachytených iónov. … Potom, čo molekuly rozpúšťadla vytlačia analyt, analyt možno vyniesť z kolóny na analýzu.

Koľko protilátok potrebujete na Coip?

Pre rutinné Co-IP experimenty je protilátka, ktorú som použil, nie viac ako 2 ug (V mojej súprave postačuje 1,4 – 2,0 ug protilátky na zachytenie 2 500 – 5 000 ug proteínový lyzát.) Stále však závisí od hladín expresie vašich cieľových proteínov vo vašich vzorkách, takže pravdepodobne budete musieť urobiť nejaké úpravy.

How Much Protein Do You Need? Explained by Dr. Berg

How Much Protein Do You Need? Explained by Dr. Berg
How Much Protein Do You Need? Explained by Dr. Berg
Našlo sa 33 súvisiacich otázok

Odporúča: