Pri HPLC s reverznou fázou je poradie elúcie opačné ako pri separácii na normálnej fáze, pričom ako prvé sa eluujú polárnejšie rozpustené látky. Zvýšenie polarity mobilnej fázy vedie k dlhším retenčným časom.
Ktorá zlúčenina bude eluovať ako prvá pri separácii HPLC na reverznej fáze?
Chromatografia na reverznej fáze využíva polárnu (vodnú) mobilnú fázu. Výsledkom je, že hydrofóbne molekuly v polárnej mobilnej fáze majú tendenciu adsorbovať sa do hydrofóbnej stacionárnej fázy a hydrofilné molekuly v mobilnej fáze prejdú kolónou a eluujú sa ako prvé.
Aké zlúčeniny eluujú pri HPLC ako prvé?
Najmenej polárne analyty eluujte ako prvé, polárne analyty sa zadržia dlhšie. Používajú sa rozpúšťadlá s nízkou až strednou polaritou (hexán, etylacetát, metanol).
Čo sa eluuje ako prvé pri normálnej HPLC?
Pri chromatografii na normálnej fáze sa najmenej polárne zlúčeniny eluujú ako prvé a najpolárne zlúčeniny sa eluujú ako posledné. Mobilná fáza pozostáva z nepolárneho rozpúšťadla, ako je hexán alebo heptán, zmiešaného s mierne polárnejším rozpúšťadlom, ako je izopropanol, etylacetát alebo chloroform.
Ktorá zlúčenina bude eluovať ako prvá?
Slabé polárne rozpúšťadlo by malo tendenciu eluovať najskôr menej polárne molekuly. hexán by sa teda pravdepodobne eluoval ako prvý, pretože alkány sú MIEROM menej polárne ako alkény.